Pull Down与免疫共沉淀都是用于蛋白质与蛋白质相互作用的分析方法,二者在原理上存在差异。免疫共沉淀(Co-immunoprecipitation,Co-IP)通过使用靶蛋白特异性抗体来间接捕获与特定靶蛋白结合的蛋白,从而识别生理相关的蛋白-蛋白相互作用,进一步分析这些蛋白质复合物可以鉴定新的结合蛋白、结合亲和力、结合动力学以及靶蛋白的功能。Co-IP是免疫沉淀(IP)的延伸,原理也与IP相同,只是与抗原相结合的蛋白质也被沉淀下来。因此,一个实验是否被称为IP或Co-IP取决于实验的焦点是主要目标(抗原)还是次要目标(相互作用蛋白质)。Co-IP常用于分析多种蛋白质的相互作用及其功能,抗体的选择对Co-IP是否成功至关重要。因此,在实验前应该准确预测与靶蛋白相互作用的蛋白质。
Pull Down是一种类似于免疫沉淀的亲和纯化技术,只是使用“诱饵”蛋白代替抗体。亲和层析(即亲和纯化)方法大大提高了蛋白质纯化的速度和效率,同时提供了对潜在蛋白结合体进行下拉或共纯化的技术平台。在Pull Down分析中,将被亲和试剂标签标记的诱饵蛋白固定在固体基质上,从而产生用于纯化与诱饵蛋白相互作用的其他蛋白的“二级亲和载体”。然后将含有诱饵蛋白的二级亲和支持物与含有假定的“猎物”蛋白质的蛋白质混合物如细胞裂解物一起孵育,可与该诱饵蛋白相互作用的“猎物”蛋白便被捕获。
百泰派克生物科技使用Thermo公司zuì新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪结合Nano-LC,提供基于Pull Down和Co-IP的蛋白质相互作用分析服务技术包裹,可以鉴定两种已知的感兴趣蛋白质可能存在的直接相互作用、寻找可能与目标蛋白存在相互作用关系的未知蛋白,欢迎免费咨询。
百泰派克生物科技-生物药物表征,生物质谱多组学优质服务商
北京百泰派克生物科技有限公司(Beijing Bio-Tech Pack Technology Company Ltd. 简称BTP)从事以生物质谱为依托的生物药物表征,大分子物质(包括蛋白质、多肽、代谢物)质谱分析以及小分子物质检测服务。
公司采用ISO9001质量控制体系,专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务;
获国家CNAS实验室认可,为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务;
业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等;
7大质量控制检测平台,满足您一站式服务需求;
服务3000+企业,10000+客户的选择;
致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!