灭活疫苗病毒结构蛋白等电点测定

灭活疫苗病毒结构蛋白等电点测定--检测技术服务详情

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灭活疫苗是指将病原微生物培养后灭活而制成的疫苗，是一种较为常见的疫苗类型。对于病毒灭活疫苗而言，病毒的结构蛋白是疫苗zuì重要的组成成分之一，它包括表面蛋白和核壳蛋白。病毒的结构蛋白是病毒生命周期和病毒感染宿主的关键因素，也是疫苗引发免疫反应的主要靶点。电荷异质性是灭活疫苗病毒结构蛋白的关键属性，对疫苗的稳定性、体内体外的生物学活性以及动力学功能发挥均具有重要的影响。灭活疫苗病毒结构蛋白的电荷异质性表征首当其冲就是等电点的测定。

等电点是指在一个分子不携带净电荷或在统计平均值上呈电中性时的pH值。jīng确测定等电点是灭活疫苗病毒结构蛋白鉴定的一个有效手段，因为特定蛋白质的等电点是固定的，这与该蛋白的组分与构象相关。此外，蛋白质等电点也是许多常见生化分析、蛋白组学实验中的一项重要指标，例如双向凝胶电泳（2D-PAGE）、X射线结晶、液质联用等实验中。

常用的灭活疫苗病毒结构蛋白等电点测定方法主要有：沉淀法、分光光度法和等电聚焦法等，基于毛细管电泳的等电聚焦法凭借其耗时短、jīng确度高以及样本用量少等优点已成为等电点测定的强有力工具。毛细管等电聚焦法利用蛋白质在等电点时净电荷为零的原理将待测蛋白质在特殊的缓冲液中进行聚丙烯凝胶电泳，这种特殊的缓冲液为两性电解质，可以在凝胶内形成连续的pH梯度，当电泳完毕时，蛋白质迁移到的位置对应的pH就是该蛋白质的等电点。

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